12 Февраль 2021
1404
Духовлинов Илья Владимирович, Федорова Е.А., Богомолова Е.Г., Добровольская О.А., Черняева Е.Н., Аль-Шехадат Р.И., Симбирцев А.С. Получение рекомбинантного белка CRM 197 в клетках E. coli // Инфекция и иммунитет. – 2015. – Т.5. – № 1. С. 37–44.
Аннотация
Белок CRM197 является нетоксичным производным дифтерийного токсина и характеризуется одной мутацией, а именно, заменой глицина на глутаминовую кислоту в положении 52. Белок CRM197 является перспективным адъювантом нового поколения, который может быть успешно использован в вакцинных и терапевтических препаратах. Классическим способом получения дифтерийного токсина и его нетоксичных производных является продукция в клетках Corynebacterium diphtheriae. Преимущество использования E. coli в качестве продуцента состоит в том, что данный метод является более простым и дешевым, и позволяет получать рекомбинантный CRM197 в короткие сроки с использованием непатогенного микроорганизма. В данной работе использовался запатентованный высокопродуктивный штамм-продуцент рекомбинантного CRM197 на основе клеток E. coli. В ходе исследования подобран оптимальный протокол индукции экспрессии гена crm197, разработан метод получения высокоочищенного препарата рекомбинантного CRM197 путем последовательного применения ионообменной, гидрофобной и молекулярно-ситовой типов хроматографии.
Ключевые слова: рекомбинантный белок, recombinant protein, CRM197, адъювант, adjuvant, конъюгированные вакцины, conjugate vaccine, дифтерийный токсин, diphtheria toxin, Escherichia coli.
Полный текст: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=23574502
