Название фермента. Термостабильная полимераза для NGS.
Описание. Модифицированный большой фрагмент ДНК-полимеразы Bacillus stearothermophilus, масса 67 кДа. Имеет 5´→3´ вытесняющюю активностью, 5´ → 3´ полимеразную активность, слабую активностью обратной транскриптазы, не обладает 5´ → 3´ экзонуклеазной активностью.
Применение:
– подготовка библиотек для NGS секвенирования.
Активность / единица активности фермента. 8 ед. акт./ мкл. За единицу активности ДНК полимеразы берется количество фермента, нужное для включения 10 нмоль дНТФ в кислотонерастворимую фракцию в при температуре плюс 65°C, в течение 30 минут.
Происхождение фермента. ДНК-полимеразу получают из штамма E. coli, который содержит модифицированный ген ДНК-полимеразы Bacillus stearothermophilus.
Условия реакции. 1Х Реакционный Буфер, инкубировать при температуре от плюс 60 ⁰С до плюс 65 ⁰С. Инактивация происходит при плюс 80 ⁰С в течение 20 мин.
Буфер для хранения. 10 мМ Трис рН 7.5, 0,1 М KCl, 0,001 мДТТ, 0,1 мМ ЭДТА, 0,1% Triton X100.
Условия хранения. 1 год при минус 20 ⁰С.
