15 Ноябрь 2022
747
Абрамова О.А., Фомина Ю.А. Криоконсервация первичного биологического материала пульпы зуба с дальнейшим подтверждением выживаемости МСК после разморозки.
Были проведены эксперименты по криоконсервации первично выделенных клеток из пульпы зуба без их культивирования с последующим размораживанием и проверкой жизнеспособности.
Молочный зуб доставили в лабораторию в транспортировочной жидкости через 48 часов после выпадения. Промыли и инкубировали 3 раза в ФСБ с 10 % антибиотиком-антимикотиком. Затем подвергли стандартной методике выделения МСК из пульпарной камеры. Выделение клеток из пульпы зуба проводили ферментативным способом. Полученную суспензию клеток пульпы зуба и сам зуб разделяли по разным пробиркам. Суспензию клеток и зуб внесли в криосреду 10% ДМСО и 90% ФБС и заморозили по стандартной методике. Образцы находились в жидком азоте в течении 2-х недель. Через 2 недели материал разморозили медленной нейтрализацией ДМСО и высадили в два фласка. На следующий день отмыли с двукратной инкубацией в растворе ФСБ с 10 % антибиотиком-антимикотиком. Культивировали в стандартной полной питательной среде для МСК. Клетки вышли из заморозки хорошо. Клональных зон много, во фласке с зубом также были обнаружены клетки, но в меньшем количестве.
Выводы
– МСК пульпы молочных зубов возможно замораживать сразу после выделения.
– Заморозку возможно производить вместе с зубом, без этапа выделения клеток.
