Название. Dreamnase эндонуклеаза (аналог Бензоназы)
Описание. Dreamnase эндонуклеаза рекомбинантная эндонуклеаза Serratia marcescens. Фермент продуцируется штаммом E. coli BL21 (DE3). Структурно Dreamnase эндонуклеаза представляет собой гомодимер с массой субъединиц 30 кДа. Dreamnase эндонуклеаза расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые) и эффективна в широком диапазоне рабочих условий. Dreamnase эндонуклеаза гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований.
Преимущества Dreamnase эндонуклеазы:
- Повышенная активность фермента
| Dreamnase эндонуклеаза | не менее 3×106 ед/мг белка |
| Импортный аналог 1 | не менее 1×106 ед/мг белка |
| Импортный аналог 2 | не менее 6×105 ед/мг белка |
- Присутствие белка полностью в виде гомодимера, подтвержденное аналитической ГПХ
- По показателям чистоты и посторонним примесей фермент соответствует требованиям ГФ
- Произведено без использования компонентов животного происхождения
Активность. Не менее 2000 Ед/мкл (3 ×106 Ед/мг).
Единица активности. За единицу активности Dreamnase эндонуклеаза принимается количество фермента, превращающего 1,0 ОП260 соницированной ДНК спермы лосося в нуклеотиды за 30 минут при 37 °C в реакционном буфере: 50 мМ Трис-HСl, pH 8,0 и 1 мМ MgCl₂. Это соответствует полному расщеплению 50 мкг соницированной ДНК спермы лосося в олигонуклеотиды.
Чистота. Более 90% по данным электрофореза в ДСН ПААГ в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях.
Условия хранения. При минус 20 °C в 50 мМ Трис-HCl, pH 8,0±0,2, 20 мМ NaCl, 2 мМ MgCl₂ и 50% глицерине (v/v).
| Наименование показателей | Требования ТУ | Результаты анализа | |
| Описание | Прозрачная бесцветная жидкость | Прозрачная бесцветная жидкость | |
| Активность | Не менее 2000 Ед/мкл | 2000 Ед/мкл | |
| РНК-азная активность | Присутствует | Присутствует | |
| Электрофоретическая подвижность | В геле должна быть видна одна полоса в области масс 25–37 кДа | Выявляется одна полоса в области масс 25–37 кДа, совпадающая с заявленной | |
| Посторонние примеси: | |||
| 1. Чистота | Чистота не менее 90 % | Чистота белка в не восстанавливающих условиях – 97,9 % Чистота в восстанавливающих условиях – 98,6 % | |
| 2. Содержание ДНК клеток производственного штамм- продуцента | Отсутствует | Отсутствует | |
| 3. Содержание белка клеток производственного штамма- продуцента | Не более 1 % | 0,12 % | |
| Бактериальные эндотоксины | Менее 0,001 ЕЭ на 1000 Ед | 0,00012 ЕЭ на 1000 Ед | |
| Протеазная активность | Отсутствует | Отсутствует | |
| Упаковка | 2 мл в микропробирку с завинчивающейся крышкой. 2 пробирки в пачке из картона | Соответствует | |
| Маркировка | В соответствии с ТУ | Соответствует | |
