15 Ноябрь 2022
318
Абрамова О.А., Фомина Ю.А. Подбор оптимального метода транспортировки и криоконсервации ММСК.
Потребность клинической медицины в технологиях, обеспечивающих эффективное восстановление органов и тканей, утраченных в результате травм, резекции опухолей, аномалий развития и других патологических состояний, приводит к необходимости вести поиск новых подходов к использованию регенеративного потенциала стволовых клеток. Наиболее доступными и безопасными для применения в клинической практике являются аутогенные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК), получаемые из разных тканей взрослого человека. С возрастом пролиферативная активность и способность к дифференцировке ММСК заметно снижаются, поэтому выделение этих клеток из тканей людей в молодом возрасте и их банкирование позволит сохранить биологический потенциал ранних популяций [1, 2].
Одним из наиболее доступных источников ММСК у детей являются ткани пульпы молочных зубов, выпавших естественным путем [3]. Получение биологического материала из таких зубов относится к неинвазивным методам, поэтому не имеет этических ограничений и может применяться для создания персонального банка стволовых клеток пациента с целью применения, при необходимости, спустя десятки лет. Важным аспектом при разработке технологий забора и хранения клеток и тканей пульпы является сохранение их биологических свойств после криоконсервации.
Для длительного хранения ММСК пульпы выпавшего молочного зуба (в зарубежной номенклатуре — SHED-клеток (от англ. stem cells from humanexfoliated deciduous teeth)) используют разные подходы к криоконсервации: замораживание целого зуба, извлеченной из зуба интактной пульпы и культур SHED-клеток, полученных из тканей пульпы [4—7]. Поскольку пульпа молочных зубов постепенно деградирует по мере резорбции корня зуба, и, следовательно, не каждый образец пульпы содержит жизнеспособные клетки, наиболее эффективно порционно криоконсервировать культуры SHED-клеток.
Результаты недавно проведённого исследования показали, что криоконсервация не влияет на пролиферативный потенциал SHED-клеток [8]. Однако для эффективного применения SHED-клеток с целью стимулирования регенерации костной ткани необходимы данные о влиянии криоконсервации на их способность дифференцироваться остеогенном направлении. Однако, выпавший зуб не всегда удается сразу доставить в лабораторию для выделения МСК. Нами была разработана транспортная среда, позволяющая сохранить клетки до выделения. Были опробованы раствор NaCl с разным % соотношением антибиотика, культуральные среды с различными добавками и выбран оптимальный состав транспортной среды (ООО «Иннова плюс»), при котором были выделены МСК как из пульпы молочных зубов, так и маляров взрослого человека.
ЛИТЕРАТУРА:
